سطح 3 سرعت صفحه لرزش ST-2000A تست کننده سموم قارچی ارتقا یافته

دستگاه ارتقا یافته تست سموم قارچی صفحه ارتعاشی سطح 3 ST-2000A، صفحه نمایش قابل مشاهده

آنالایزر مایکوتوکسین ST-2000A یک ابزار تحلیلی ضروری برای آزمایش آفلاتوکسین و سنجش ایمونواسوربنت متصل به آنزیم است. اصل سنجش ایمونواسوربنت متصل به آنزیم فاز جامد (ELISA)، یعنی سنجش ایمونواسوربنت متصل به آنزیم (ELISA)، از این ابزار و کیت B1 تشکیل شده است که می تواند برای تعیین محتوای آفلاتوکسین B1 و سایر مایکوتوکسین ها در نمونه ها به صورت محدود و کمی (در صورت مجهز بودن به کیت های دیگر، سموم دیگر را می توان تشخیص داد) استفاده شود. به طور گسترده در تشخیص آفلاتوکسین B1 و سایر مایکوتوکسین ها در مواد غذایی، خوراک دام، روغن، محصولات لبنی، داروها، نوشیدنی ها، شراب و سایر محصولات استفاده می شود.

ویژگی های عملکرد:

1. عملکرد نمایشگر: صفحه نمایش LCD رنگی، برد توزیع تلفن تصویری، نمایش اطلاعات کل برد، عملکرد صفحه لمسی

2. عملکرد صفحه ارتعاشی: سرعت صفحه ارتعاشی سطح 3، زمان قابل تنظیم 0-255 ثانیه

3. ایستگاه کاری: نرم افزار نشانگر آنزیم حرفه ای، که می تواند 500 گروه از برنامه ها، 100000 نتیجه نمونه را ذخیره کند و حالت های محاسباتی غنی مانند جذب، معادله خطی، معادله لگاریتمی، معادله درجه دوم، معادله درجه سوم، معادله لگاریتمی درصد-غلظت جذب، تابع اسپلاین، میزان مهار و غیره را ارائه می دهد.

پارامترهای فنی:

منبع نور: لامپ هالوژن وارداتی DC12V 22W

محدوده طول موج: 400-900 نانومتر

فیلتر: 405، 450، 492، 630 نانومتر به عنوان استاندارد، سایر طول موج ها اختیاری

محدوده خواندن: 0-4.000Abs

وضوح: 0.001Abs

خطای نشانگر: ≤± 0.01Abs

پایداری: ≤± 0.003Abs

تکرارپذیری: ≤ 0.3%

اندازه: 400mm * 260mm * 200mm

1 اصل و کاربرد

این کیت از روش ELISA رقابتی غیرمستقیم برای تشخیص آفلاتوکسین B1 (AFB1) در غلات، خوراک دام و سایر نمونه ها استفاده می کند. این کیت از صفحه نشان دار شده با آنزیم از پیش پوشش داده شده با آنتی ژن جفت شده، نشانگر آنزیم ترب کوهی، آنتی بادی، استاندارد و سایر معرف های منطبق تشکیل شده است. در طول آزمایش، محلول استاندارد یا نمونه، آفلاتوکسین B1 موجود در نمونه و صفحه آنزیم از قبل با آنتی ژن مزدوج پوشانده شده اند تا با آنتی بادی ضد آفلاتوکسین B1 رقابت کنند. پس از افزودن نشانگر آنزیم، از سوبسترای TMB برای توسعه رنگ استفاده کنید. مقدار جذب نمونه با محتوای آفلاتوکسین B1 موجود در نمونه رابطه معکوس دارد. مقدار باقی مانده آفلاتوکسین B1 در نمونه را می توان با مقایسه با منحنی استاندارد به دست آورد.

2 شاخص های فنی

2.1 حساسیت کیت: 0.03ppb (ng/ml)

2.2 حالت واکنش: 25 ℃، 30min~15min

2.3 حد تشخیص پایین:

غلات...................................................... 0.15ppb

خوراک فرموله شده.......................................... 0.3 ppb

روغن خوراکی، بادام زمینی.................................... 0.6ppb

سس سویا، گندم و سایر خوراک ها.............................. 0.3 ppb

آبجو.......................................... 0.3 ppb

شراب، سس سویا، سرکه.................................... 0.15ppb

2.4 میزان واکنش متقابل:

آفلاتوکسین B1 100%

2.5 میزان بازیابی نمونه:

غلات و خوراک فرموله شده.............................. 85% ± 15%

بادام زمینی.................................... 82 ± 15%

روغن خوراکی.................................... 85 ± 15%

سس سویا، گندم و سایر خوراک ها.............................. 83 ± 15%

آبجو.................................... 84 ± 15%

شراب، سس سویا، سرکه............ 87 ± 15%

3 ترکیب کیت

صفحه نشانگر آنزیم.................................... 96 سوراخ

محلول استاندارد (درپوش سیاه): 1ml هر کدام

0ppb,0.03ppb,0.06ppb,0.12ppb,0.24ppb,0.48ppb

محلول استاندارد بالا: 100ppb.............................. 1ml

نشانگر آنزیم (درپوش قرمز).............................. 5.5ml

محلول کار آنتی بادی (درپوش آبی).............................. 5.5ml

محلول سوبسترای A (درپوش سفید).............................. 6ml

مایع سوبسترای B (درپوش سیاه).............................. 6ml

محلول خاتمه (درپوش زرد).............................. 6ml

محلول شستشوی غلیظ شده 20X (درپوش سفید)..................... 40ml

کتابچه راهنما.....................1 نسخه

4 تجهیزات و معرف های مورد نیاز

4.1 دستگاه: تستر آفلاتوکسین، چاپگر، همگن کننده، دستگاه خشک کن نیتروژن، نوسانگر، سانتریفیوژ، پیپت مدرج، ترازو (حساسیت 0.01 گرم)

4.2 میکروپیپت: تک کاناله 20 µ l-200 µ l, 100 µ l-1000 µ l, چند کاناله 300 µ l

4.3 معرف: متانول، n-هگزان، تری کلرومتان یا دی کلرومتان

5 پیش تیمار نمونه

5.1 دستورالعمل قبل از پردازش نمونه:

دستگاه آزمایشگاهی باید تمیز باشد و از سر مکش یکبار مصرف برای جلوگیری از آلودگی و تداخل با نتایج آزمایش استفاده کنید.

5.2 تهیه محلول:

محلول 1: عصاره نمونه

70% متانول، یعنی V متانول: V آب دیونیزه=7:3.

5.3 مراحل پیش تیمار نمونه:

5.3.1 روش پردازش دانه

1) 2 گرم از نمونه خرد شده را در یک لوله سانتریفیوژ 50 میلی لیتری وزن کنید، 5 میلی لیتر محلول استخراج نمونه اضافه کنید، به مدت 5 دقیقه تکان دهید، 4000 دور در دقیقه در دمای اتاق/10 دقیقه مرکز جداسازی;

2) 0.5 میلی لیتر از سوپرناتانت را بردارید، 0.5 میلی لیتر آب دیونیزه اضافه کنید و خوب مخلوط کنید;

3) 50 µ L تجزیه و تحلیل را بردارید.

نسبت رقت نمونه: 5 حد تشخیص پایین: 0.15ppb

5.3.2 روش های پردازش برای نمونه هایی با جذب آب قوی مانند پوسته ذرت و سبوس گندم

1) 2 گرم از نمونه خرد شده را در یک لوله سانتریفیوژ 50 میلی لیتری وزن کنید، 20 میلی لیتر محلول استخراج نمونه اضافه کنید، به مدت 5 دقیقه تکان دهید، 4000 دور در دقیقه در دمای اتاق/10 دقیقه مرکز جداسازی;

2) 0.5 میلی لیتر از سوپرناتانت را بردارید، 0.5 میلی لیتر آب دیونیزه اضافه کنید و خوب مخلوط کنید؛ (برای نمونه با محتوای سم بسیار بالا، می توان آن را با 35٪ متانول رقیق کرد و سپس آزمایش کرد. به عنوان مثال، 0.1 میلی لیتر از محلول مخلوط شده در 2) و 0.9 میلی لیتر متانول 35٪ را بردارید تا مخلوط شود. نسبت رقت نمونه نهایی 200 است و حد تشخیص 6ppb است.)

3) 50 µ L تجزیه و تحلیل را بردارید.

نسبت رقت نمونه: 20 حد تشخیص پایین: 0.6ppb

توجه: از آنجایی که توزیع سم در نمونه ناهموار است، لازم است نمونه ها را از چندین نقطه بگیرید و قبل از گرفتن 2 گرم برای آزمایش، آنها را کاملاً مخلوط کنید.

5.3.3 روش پردازش خوراک فرموله شده

1) 2 گرم از نمونه خرد شده را در یک لوله سانتریفیوژ 50 میلی لیتری وزن کنید، 10 میلی لیتر محلول استخراج نمونه اضافه کنید، به مدت 5 دقیقه تکان دهید، 4000 دور در دقیقه در دمای اتاق/10 دقیقه مرکز جداسازی;

2) 0.5 میلی لیتر از سوپرناتانت را بردارید، 0.5 میلی لیتر آب دیونیزه اضافه کنید و خوب مخلوط کنید;

3) 50 µ L تجزیه و تحلیل را بردارید.

نسبت رقت نمونه: 10 حد تشخیص پایین: 0.3ppb

5.3.4 روش های درمان خوراک روغن خوراکی، بادام زمینی و چربی بالا

1) 2 گرم از نمونه خرد شده را در یک لوله سانتریفیوژ 50 میلی لیتری وزن کنید، 8 میلی لیتر n-هگزان و 10 میلی لیتر محلول استخراج نمونه اضافه کنید، به مدت 5 دقیقه تکان دهید، 4000 دور در دقیقه در دمای اتاق/10 دقیقه مرکز جداسازی;

2) مایع بالایی را بردارید، 0.5 میلی لیتر از مایع پایینی را بردارید و 0.5 میلی لیتر آب دیونیزه اضافه کنید، خوب مخلوط کنید، سپس 0.5 میلی لیتر از مایع مخلوط شده را بردارید و 0.5 میلی لیتر متانول 35٪ اضافه کنید، به مدت 30 ثانیه تکان دهید;

3) 50 µ L تجزیه و تحلیل را بردارید.

نسبت رقت نمونه: 20 حد تشخیص پایین: 0.6ppb

5.3.5 مواد غذایی یا چاشنی ها مانند سس ها، گندم، بیسکویت ها، شیرینی ها و روش های پردازش خوراک مانند کنسانتره خوراک

1) 2 گرم از نمونه خرد شده را در یک لوله سانتریفیوژ 50 میلی لیتری وزن کنید، 10 میلی لیتر محلول استخراج نمونه اضافه کنید، به مدت 5 دقیقه تکان دهید، 4000 دور در دقیقه در دمای اتاق/10 دقیقه مرکز جداسازی;

2) 2 میلی لیتر از سوپرناتانت را بردارید، 4 میلی لیتر تری کلرومتان (یا دی کلرومتان) اضافه کنید، به مدت 5 دقیقه تکان دهید، 4000 دور در دقیقه در دمای اتاق/10 دقیقه مرکز جداسازی;

3) مایع بالایی را به ظرف دیگری منتقل کنید، مایع پایینی را برای حالت آماده به کار بگذارید، 4 میلی لیتر دیگر کلروفرم (یا دی کلرومتان) به مایع بالایی اضافه کنید، به مدت 5 دقیقه کاملاً تکان دهید و مخلوط کنید و دمای اتاق 4000 دور در دقیقه/مرکز جداسازی به مدت 10 دقیقه است;

4) مایع بالایی را بردارید، مایع پایینی را دو بار ترکیب کرده و کاملاً مخلوط کنید;

5) 2 میلی لیتر از مایع پایینی ترکیبی را بردارید و آن را تحت نیتروژن 50-60 ℃ خشک کنید;

6) 0.5 میلی لیتر عصاره نمونه اضافه کنید تا ماده خشک شده کاملاً حل شود، و سپس 0.5 میلی لیتر آب دیونیزه اضافه کنید تا مخلوط شود;

7) 50 µ L تجزیه و تحلیل را بردارید.

نسبت رقت نمونه: 10 حد تشخیص پایین: 0.3ppb

5.3.6 روش پردازش آبجو

1) آبجو را کاملاً هم بزنید (CO2 را حذف کنید)، 2 میلی لیتر نمونه آبجو بردارید، 1 میلی لیتر آب مقطر اضافه کنید، 7 میلی لیتر متانول اضافه کنید و به مدت 5 دقیقه تکان دهید;

2) 0.5 میلی لیتر از محلول نمونه مخلوط شده را بردارید و 0.5 میلی لیتر آب دیونیزه اضافه کنید تا خوب مخلوط شود;

3) 50 µ L تجزیه و تحلیل را بردارید.

نسبت رقت نمونه: 10 حد تشخیص پایین: 0.3ppb

5.3.7 روش درمان شراب، سس سویا و سرکه

1) 2 میلی لیتر نمونه بردارید، 2 میلی لیتر آب مقطر اضافه کنید، 10 میلی لیتر تری کلرومتان (یا دی کلرومتان) اضافه کنید، به مدت 5 دقیقه تکان دهید، 4000 دور در دقیقه در دمای اتاق/10 دقیقه مرکز جداسازی;

2) 1 میلی لیتر از مایع پایینی را بردارید و آن را تحت نیتروژن 50-60 ℃ خشک کنید;

3) 0.5 میلی لیتر عصاره نمونه اضافه کنید تا ماده خشک شده کاملاً حل شود، سپس 0.5 میلی لیتر آب دیونیزه اضافه کنید و خوب مخلوط کنید;

5) 50 µ L تجزیه و تحلیل را بردارید.

نسبت رقت نمونه: 5 حد تشخیص پایین: 0.15ppb

6 مراحل ELISA

معرف مورد نیاز را از محیط نگهداری سرد 4 ℃ خارج کرده و بیش از 30 دقیقه در دمای اتاق قرار دهید. ممکن است کریستال هایی وجود داشته باشد که نیاز به بازگرداندن به دمای اتاق برای حل شدن کامل دارند، زمانی که محلول شستشو در سردخانه است. هر معرف مایع باید قبل از استفاده تکان داده شود. تعداد مورد نیاز صفحات و قاب های میکروپور را بیرون بیاورید، صفحات میکروپور استفاده نشده را در کیسه های خود مهر و موم قرار دهید و آنها را در 2-8 ℃ نگهداری کنید.

قبل از آزمایش، 20 × محلول شستشوی غلیظ شده با 20 برابر به محلول شستشوی کار رقیق می شود.

6.1 شماره گذاری: چاه های مربوطه نمونه و استاندارد را به ترتیب شماره گذاری کنید، برای هر نمونه و استاندارد دو سوراخ موازی ایجاد کنید و موقعیت سوراخ استاندارد و سوراخ نمونه را ثبت کنید.

6.2 واکنش افزودن نمونه: 50 µ l/چاه استاندارد یا نمونه را به چاه های مربوطه خود اضافه کنید، سپس 50 µ l/چاه نشانگر آنزیم، سپس 50 µ l/چاه محلول کار آنتی بادی اضافه کنید، صفحه را با یک غشای پوششی مهر و موم کنید، به آرامی به مدت 5 ثانیه تکان دهید، مخلوط کنید و در دمای 25 ℃ به مدت 30 دقیقه واکنش دهید.

6.3 شستشو: غشای پوششی را با دقت بردارید، مایع موجود در سوراخ را خشک کنید، سوراخ را کاملاً با محلول شستشوی کار 250 µ l/سوراخ به مدت 5 بار، با فاصله 30 ثانیه بشویید و با کاغذ جاذب خشک کنید (حباب هایی که پس از ضربه زدن حذف نمی شوند را می توان با یک سر تفنگ تمیز سوراخ کرد).

6.4 توسعه رنگ: 50 µ l محلول سوبسترای A و 50 µ l محلول سوبسترای B را به هر سوراخ اضافه کنید، به آرامی به مدت 5 ثانیه تکان دهید و خوب مخلوط کنید و در تاریکی در دمای 25 ℃ به مدت 15 دقیقه رنگ ایجاد کنید.

6.5 خاتمه: 50 µ l محلول خاتمه را به هر سوراخ اضافه کنید، به آرامی تکان دهید و خوب مخلوط کنید تا واکنش خاتمه یابد.

6.6 اندازه گیری مقدار جذب: از تستر آفلاتوکسین برای اندازه گیری مقدار جذب هر سوراخ در 450 نانومتر (دو طول موج 450/630 نانومتر توصیه می شود) استفاده کنید. تعیین باید ظرف 10 دقیقه پس از خاتمه واکنش تکمیل شود

6.7 تستر آفلاتوکسین خودکار ST-2000A به طور خودکار تعیین را تکمیل می کند و به طور خودکار نتایج را تولید می کند.