دستگاه تست سموم قارچی ST-2000A، عملکرد صفحه لمسی، محدوده طول موج 400-999 نانومتر

تست کننده مایکوتوکسین ST-2000A دارای روش های کاربری و محاسبه روی صفحه لمسی غنی است

ST-2000A Mycotoxin Analyzer یک ابزار تحلیلی ضروری برای آزمایش آفلاتوکسین و آنتیزایم مرتبط با ایمونوسربنت است.به عبارت دیگر، آزمایش ایمنسربنت مرتبط با آنزیم (ELISA)، از این ابزار و کیت B1 تشکیل شده است،که می تواند برای تعیین محتوای آفلاتوکسین B1 و سایر میکوتوکسین ها در نمونه ها به صورت محدود و کمی استفاده شود (اگر با کیت های دیگر مجهز باشد)این روش به طور گسترده ای در تشخیص افلاتوکسین B1 و سایر میکوتوکسین ها در مواد غذایی، مواد غذایی، روغن، محصولات لبنی، داروها، نوشیدنی ها، شراب و سایر محصولات استفاده می شود.

ویژگی های عملکرد:

1عملکرد صفحه نمایش: صفحه LCD رنگی، صفحه توزیع ویدئوفون، نمایش کل اطلاعات صفحه نمایش، عملکرد صفحه نمایش لمسی

2. عملکرد صفحه لرزش: سطح 3 سرعت صفحه لرزش، زمان 0-255 ثانیه قابل تنظیم

3ایستگاه کاری: نرم افزار نشانگر آنزیم حرفه ای، که می تواند 500 گروه برنامه، 100000 نتیجه نمونه را ذخیره کند و حالت های محاسبه غنی مانند جذب، معادله خطی،معادله لوگاریتیمی، معادله مربع، معادله مکعب، معادله لوگاریتمیک جذب درصد غلظت، تابع spline، نرخ مهار، و غیره

پارامترهای فنی:

منبع نور: لامپ هالوجنی وارداتی DC12V 22W

محدوده طول موج: 400-900nm

فیلتر: ۴۰۵، ۴۵۰، ۴۹۲، ۶۳۰nm به عنوان استاندارد، طول موج های دیگر اختیاری

محدوده خواندن: 0-4.000Abs

رزولوشن: 0.001Abs

خطای نمایش: ≤ ± 0.01Abs

ثبات: ≤ ± 0.003Abs

تکرار پذیری: ≤ 0.3٪

اندازه: 400mm * 260mm * 200mm

1 اصل و کاربرد

این کیت از روش ELISA رقابتی غیرمستقیم برای تشخیص افلاتوکسین B1 (AFB1) در دانه ها، خوراک و نمونه های دیگر استفاده می کند. کیت از یک صفحه با نام گذاری آنزیم که با آنتی ژن اتصال پوشانده شده است، تشکیل شده است.نشانگر آنزیم هویجدر طول آزمایش، محلول استاندارد یا نمونه را اضافه کنید.آفلاتوکسین B1 در نمونه و صفحه آنزیم با آنتی بادی مجتمع پوشش داده شده است تا برای آنتی بادی ضد آفلاتوکسین B1 رقابت کند.پس از اضافه کردن نشانگر آنزیم، از بستر TMB برای ایجاد رنگ استفاده کنید. ارزش جذب نمونه با محتوای آفلاتوکسین B1 موجود در نمونه ارتباط منفی دارد.مقدار باقی مانده آفلاتوکسین B1 در نمونه را می توان با مقایسه با منحنی استاندارد بدست آورد..

2 شاخص های فنی

2.1 حساسیت کیت: 0.03ppb (ng/ml)

2.2 حالت واکنش: 25 °C، 30 دقیقه تا 15 دقیقه

2.3 حد پایین تشخیص:

غلات 0.15ppb

مواد غذایی فرمولی 0.3 ppb

روغن غذایی، بادام زمینی 0.6ppb

سس سویا، گندم و سایر مواد غذایی 0.3 ppb

آبجو 0.3 ppb

شراب، سس سویا، سرکه

2.4 سرعت واکنش متقابل:

افلاتوکسین B1 100٪

2.5 نرخ بازیافت نمونه:

غلات و خوراک فرموله 85٪ ± 15٪

بادام زمینی 82 ± 15%

روغن غذایی 85 ± 15%

سس سویا، گندم و سایر مواد غذایی 83 ± 15%

آبجو 84 ± 15%

شراب، سس سویا، سرکه... 87 ± 15%

3 ترکیب کیت

صفحه نشانگر آنزیم 96 سوراخ

محلول استاندارد (پوش سیاه): هر یک 1ml

0ppb0.03ppb0.06ppb0.12ppb0.24ppb0.48ppb

محلول استاندارد بالا: 100ppb 1ml

نشانگر آنزیم (کاپ قرمز) 5.5 میلی لیتر

محلول کار آنتی بادی (کاپ آبی) 5.5 میلی لیتر

محلول سبسترات A (پوش سفید) 6 میلی لیتر

ماده مایع B (پوش سیاه) 6 میلی لیتر

محلول پایان (کاپ زرد) 6 میلی لیتر

20X محلول شستشو متمرکز (پوش سفید)

راهنمای استفاده 1 نسخه

4 تجهیزات و عوامل مورد نیاز

4.1 دستگاه: آزمایش کننده افلاتوکسین، چاپگر، همجانس ساز، دستگاه خشک کردن نیتروژن، نوسانگر، سانتریفیوژ، پیپت درجه بندی شده، ترازو (حساسیت 0.01g)

4.2 مایکروپیپت: تک کانال 20μl-200μl، 100μl-1000μl، چند کانال 300μl

4.3 واکنش دهنده: متانول، n-هکسان، تریکلور متان یا دیکلور متان

5 پیش پردازش نمونه

5.1 دستورالعمل قبل از پردازش نمونه:

دستگاه آزمایش باید تمیز باشد و از سر مکش یکبار مصرفی برای جلوگیری از آلودگی و تداخل با نتایج آزمایش استفاده کند.

5.2 آماده سازی محلول:

راه حل 1: عصاره نمونه

70٪ متانول، یعنی V متانول: V آب دیونیزه=7:3.

5.3 مراحل پیش پردازش نمونه:

5.3.1 روش پردازش دانه ها

1) 2g از نمونه خرد شده را در یک لوله سانتریفیوژ 50 میلی لیتری وزن کنید، 5ml محلول استخراج نمونه را اضافه کنید، برای 5 دقیقه تکان دهید، 4000 rpm در دمای اتاق/10 دقیقه مرکز جداسازی؛

2) 0.5ml از supernatant را بگیرید، 0.5ml از آب دیونیزه را اضافه کنید و به خوبی مخلوط کنید.

3) 50 ميكرو ليتري تحليل

نسبت رقیق سازی نمونه: 5 حد پایین تشخیص: 0.15ppb

5.3.2 روش های پردازش نمونه هایی که جذب آب بالایی دارند مانند پوسته ذرت و نخود گندم

1) 2g از نمونه خرد شده را در یک لوله سانتریفیوژ 50 میلی لیتری وزن کنید، 20 میلی لیتر محلول استخراج نمونه را اضافه کنید، برای 5 دقیقه تکان دهید، 4000 rpm در دمای اتاق/10 دقیقه مرکز جداسازی؛

2) 0.5 میلی لیتر از سوپرناتنت را بردارید، 0.5 میلی لیتر آب دیونیزه شده را اضافه کنید و به خوبی مخلوط کنید؛ (برای نمونه ای با محتوای سمی بسیار بالا، می توان آن را با 35٪ متانول رقیق کرد و سپس آزمایش کرد.1 میلی لیتر محلول مخلوط در 2) و 0.9 میلی لیتر متانول 35٪ برای مخلوط کردن. نسبت رقیق شدن نمونه نهایی 200 است و حد تشخیص 6ppb است.)

3) 50 ميكرو ليتري تحليل

نسبت رقیق سازی نمونه: 20 حد پایین تشخیص: 0.6ppb

توجه: از آنجا که توزیع سم در نمونه نامنظم است، لازم است نمونه ها از نقاط مختلف گرفته شوند و قبل از گرفتن 2g برای آزمایش به طور کامل مخلوط شوند.

5.3.3 روش پردازش خوراک فرمول

1) 2g از نمونه خرد شده را در یک لوله سانتریفیوژ 50 میلی لیتر وزن کنید، 10 میلی لیتر محلول استخراج نمونه را اضافه کنید، برای 5 دقیقه تکان دهید، 4000 rpm در دمای اتاق/10 دقیقه مرکز جداسازی؛

2) 0.5ml از supernatant را بگیرید، 0.5ml از آب دیونیزه را اضافه کنید و به خوبی مخلوط کنید.

3) 50 ميكرو ليتري تحليل

نسبت رقیق سازی نمونه: 10 حد پایین تشخیص: 0.3ppb

5.3.4 روش های درمان مواد غذایی روغن غذایی، بادام زمینی و چربی بالا

1) 2g از نمونه خرد شده را در یک لوله سانتریفیوژ 50 میلی لیتر وزن کنید، 8ml n-هکسان و 10ml محلول استخراج نمونه را اضافه کنید، برای 5 دقیقه، 4000 rpm در دمای اتاق/10 دقیقه از مرکز جداسازی تکان دهید.

2) مایع بالایی را بردارید، 0.5 میلی لیتر مایع پایین را بردارید و 0.5 میلی لیتر آب دیونیزه را اضافه کنید، به خوبی مخلوط کنید، سپس 0.5 میلی لیتر مایع مخلوط را بردارید و 0.5 میلی لیتر متانول 35٪ را اضافه کنید، برای 30 دقیقه تکان دهید.

3) 50 ميكرو ليتري تحليل

نسبت رقیق سازی نمونه: 20 حد پایین تشخیص: 0.6ppb

5.3.5 مواد غذایی یا ادویه جات مانند سس، گندم، بیسکویت، شیرینی و روش های پردازش مواد غذایی مانند غلظت مواد غذایی

1) 2g از نمونه خرد شده را در یک لوله سانتریفیوژ 50 میلی لیتر وزن کنید، 10 میلی لیتر محلول استخراج نمونه را اضافه کنید، برای 5 دقیقه تکان دهید، 4000 rpm در دمای اتاق/10 دقیقه مرکز جداسازی؛

2) 2ml از supernatant را بگیرید، 4ml از trichloromethane (یا dichloromethane) را اضافه کنید، برای 5 دقیقه تکان دهید، 4000 rpm در دمای اتاق/10 دقیقه مرکز جداسازی؛

3) مایع بالایی را به یک ظرف دیگر منتقل کنید، مایع پایین را برای آماده سازی بگذارید، 4 میلی لیتر کلوروفرم (یا دیکلرو متان) را به مایع بالایی اضافه کنید، به طور کامل تکان دهید و برای 5 دقیقه مخلوط کنید.و دمای اتاق 4000 rpm/ مرکز جداسازی برای 10 دقیقه است;

4) مایع بالایی را خارج کنید، مایع پایین را دو بار ترکیب کنید و به طور کامل مخلوط کنید.

5) 2 میلی لیتر از مایع پایین ترکیب شده را بردارید و آن را تحت 50-60 °C نیتروژن خشک کنید.

6) 0.5ml عصاره نمونه را برای حل کامل ماده خشک اضافه کنید و سپس 0.5ml آب غیر یونیزه را برای مخلوط اضافه کنید.

7) 50 ميكرو ليتري بررسي

نسبت رقیق سازی نمونه: 10 حد پایین تشخیص: 0.3ppb

5.3.6 روش پردازش آبجو

1) آبجو را کاملاً مخلوط کنید (CO2 را حذف کنید) ، 2 میلی لیتر نمونه آبجو را بردارید، 1 میلی لیتر آب تقطیر شده را اضافه کنید، 7 میلی لیتر متانول را اضافه کنید و 5 دقیقه تکان دهید.

2) 0.5 میلی لیتر محلول مخلوط نمونه را بردارید و 0.5 میلی لیتر آب دیونیزه را برای مخلوط کردن خوب اضافه کنید.

3) 50 ميكرو ليتري تحليل

نسبت رقیق سازی نمونه: 10 حد پایین تشخیص: 0.3ppb

5.3.7 روش درمان شراب، سس سویا و سرکه

1) 2 میلی لیتر از نمونه را بردارید، 2 میلی لیتر آب تقطیر شده را اضافه کنید، 10 میلی لیتر تری کلرو متان (یا دیکلرو متان) را اضافه کنید، 5 دقیقه تکان دهید، 4000 دور در دقیقه در دمای اتاق/10 دقیقه مرکز جداسازی؛

2) 1 میلی لیتر از مایع پایین را بردارید و آن را تحت 50-60 °C نیتروژن خشک کنید.

3) 0.5ml عصاره نمونه را اضافه کنید تا ماده خشک به طور کامل حل شود، سپس 0.5ml آب دیونیزه شده را اضافه کنید و به خوبی مخلوط کنید.

5) 50 μl تجزیه و تحلیل بگیرید.

نسبت رقیق سازی نمونه: 5 حد پایین تشخیص: 0.15ppb

6 مرحله از ELISA

واکنش دهنده مورد نیاز را از محیط ذخیره سازی سرد 4 درجه سانتیگراد خارج کنید و آن را در دمای اتاق برای بیش از 30 دقیقه قرار دهید.ممکن است کریستال هایی وجود داشته باشد که نیاز به بازگرداندن به دمای اتاق دارند تا به طور کامل هنگام محلول شستشوی سرد شوند.هر واکنشگر مایع باید قبل از استفاده تکان داده شود. تعداد مورد نیاز صفحات و قاب های میکروپوروس را خارج کنید، صفحات میکروپوروس استفاده نشده را در کیسه های خود بسته بندی قرار دهید و آنها را در 2-8 °C ذخیره کنید.

قبل از آزمایش، 20 × محلول شستشوی متمرکز به محلول شستشوی کاری 20 بار رقیق می شود.

6.1 شماره گذاری: سوراخ های معادل نمونه و استاندارد را به ترتیب شماره گذاری کنید، برای هر نمونه و استاندارد دو سوراخ موازی ایجاد کنید و موقعیت سوراخ استاندارد و سوراخ نمونه را ثبت کنید..

6.2 واکنش اضافه کردن نمونه: 50 μl/well از نمونه استاندارد یا نمونه را به چاه های مربوطه اضافه کنید، سپس 50 μl/well از نشانگر آنزیم اضافه کنید، سپس 50 μl/well از محلول کار آنتی بادی اضافه کنید.صفحه را با غشای صفحه پوشش بسته کنید.، به آرامی برای 5 ثانیه تکان دهید، مخلوط کنید و در 25 °C برای 30 دقیقه واکنش نشان دهید.

6.3 شستن: غشای صفحه پوشش را با دقت خارج کنید، مایع را در سوراخ خشک کنید، سوراخ را به طور کامل با محلول شستشو کاری 250 μ l / سوراخ برای 5 بار با وقفه 30 ثانیه بشویید،و آن را با کاغذ جذب کننده خشک کنید (بلبلهایی که پس از ضربه برداشته نمی شوند می توانند با یک سر تفنگ تمیز سوراخ شوند).

6.4 توسعه رنگ: 50μl محلول سبسترات A و 50μl محلول سبسترات B را به هر سوراخ اضافه کنید، به آرامی برای 5 ثانیه تکان دهید و به خوبی مخلوط کنید و در تاریکی در 25 °C برای 15 دقیقه رنگ را توسعه دهید.

6.5 پایان: 50 μl محلول پایان را به هر سوراخ اضافه کنید، به آرامی تکان دهید و به خوبی مخلوط کنید تا واکنش پایان یابد.

6.6 اندازه گیری ارزش جذب: از تست کننده افلاتوکسین برای اندازه گیری ارزش جذب هر سوراخ در 450 نانومتر استفاده کنید (دو طول موج 450/630 نانومتر توصیه می شود).اندازه گیری باید در عرض 10 دقیقه پس از پایان واکنش انجام شود.

6.7 تست کننده خودکار افلاتوکسین ST-2000A به طور خودکار تعیین را تکمیل می کند و به طور خودکار نتایج را تولید می کند.