ST-2000A Testador de Micotoxinas Operação com Tela Sensível ao Toque Faixa de Comprimento de Onda 400-999nm

O Testador de Micotoxinas ST-2000A Possui Operação com Tela Sensível ao Toque e Modos de Cálculo Ricos

O analisador de micotoxinas ST-2000A é um instrumento analítico necessário para ensaios de aflatoxinas e imunoensaio enzimático. O princípio do ensaio imunoenzimático em fase sólida (ELISA), ou seja, ensaio imunoenzimático (ELISA), é composto por este instrumento e kit B1, que pode ser usado para determinar o teor de aflatoxina B1 e outras micotoxinas em amostras de forma limitada e quantitativa (se equipado com outros kits, outras toxinas podem ser detectadas). É amplamente utilizado na detecção de aflatoxina B1 e outras micotoxinas em alimentos, rações, óleo, produtos lácteos, medicamentos, bebidas, vinho e outros produtos.

Características de desempenho:

1. Operação de exibição: tela LCD colorida, placa de distribuição de videofone, exibição de informações de toda a placa, operação com tela sensível ao toque

2. Função de placa vibratória: velocidade da placa vibratória de nível 3, tempo ajustável de 0 a 255 segundos

3. Estação de trabalho: software profissional de marcador enzimático, que pode armazenar 500 grupos de programas, 100.000 resultados de amostras e fornecer modos de cálculo ricos, como absorbância, equação linear, equação logarítmica, equação quadrática, equação cúbica, equação logarítmica de porcentagem de concentração de absorbância, função spline, taxa de inibição, etc.

Parâmetros técnicos:

Fonte de luz: lâmpada halógena importada DC12V 22W

Faixa de comprimento de onda: 400-900nm

Filtro: 405, 450, 492, 630nm como padrão, outros comprimentos de onda opcionais

Faixa de leitura: 0-4.000Abs

Resolução: 0.001Abs

Erro de indicação: ≤± 0.01Abs

Estabilidade: ≤± 0.003Abs

Repetibilidade: ≤ 0.3%

Tamanho: 400mm * 260mm * 200mm

1 Princípio e aplicação

Este kit usa o método ELISA competitivo indireto para detectar aflatoxina B1 (AFB1) em grãos, rações e outras amostras. O kit é composto por placa enzimática pré-revestida com antígeno de acoplamento, marcador de enzima peroxidase, anticorpo, padrão e outros reagentes correspondentes. Durante o teste, adicione a solução padrão ou amostra, a aflatoxina B1 na amostra e a placa enzimática são pré-revestidas com o antígeno conjugado para competir pelo anticorpo anti-aflatoxina B1. Após adicionar o marcador enzimático, use o substrato TMB para desenvolver a cor. O valor de absorbância da amostra é negativamente correlacionado com o teor de aflatoxina B1 contido na amostra. A quantidade residual de aflatoxina B1 na amostra pode ser obtida comparando com a curva padrão.

2 Indicadores técnicos

2.1 Sensibilidade do kit: 0.03ppb (ng/ml)

2.2 Modo de reação: 25 ℃, 30min~15min

2.3 Limite inferior de detecção:

Cereais...................................................... 0.15ppb

Ração balanceada.......................................... 0.3 ppb

Óleo comestível, amendoim.................................... 0.6ppb

Molho de soja, trigo e outras rações.............................. 0.3 ppb

Cerveja.......................................... 0.3 ppb

Vinho, molho de soja, vinagre.................................... 0.15ppb

2.4 Taxa de reação cruzada:

Aflatoxina B1 100%

2.5 Taxa de recuperação da amostra:

Cereais e ração balanceada.............................. 85% ± 15%

Amendoim.................................... 82 ± 15%

Óleo comestível.................................... 85 ± 15%

Molho de soja, trigo e outras rações.............................. 83 ± 15%

Cerveja.................................... 84 ± 15%

Vinho, molho de soja, vinagre............ 87 ± 15%

3 Composição do kit

Placa de marcador enzimático.................................... 96 furos

Solução padrão (tampa preta): 1ml cada

0ppb,0.03ppb,0.06ppb,0.12ppb,0.24ppb,0.48ppb

Solução padrão alta: 100ppb.............................. 1ml

Marcador enzimático (tampa vermelha).............................. 5.5ml

Solução de trabalho de anticorpos (tampa azul).............................. 5.5ml

Solução de substrato A (tampa branca).............................. 6ml

Líquido de substrato B (tampa preta).............................. 6ml

Solução de terminação (tampa amarela).............................. 6ml

Solução de lavagem concentrada 20X (tampa branca)..................... 40ml

Manual de instruções.....................1 cópia

4 Equipamentos e reagentes necessários

4.1 Aparelhos: testador de aflatoxina, impressora, homogeneizador, dispositivo de secagem por nitrogênio, oscilador, centrífuga, pipeta graduada, balança (sensibilidade 0,01g)

4.2 Micro-pipeta: canal único 20 µ l-200 µ l, 100 µ l-1000 µ l, multicanal 300 µ l

4.3 Reagente: metanol, n-hexano, triclorometano ou diclorometano

5 Pré-tratamento da amostra

5.1 Instruções antes do processamento da amostra:

O aparelho experimental deve estar limpo e usar ponta de sucção descartável para evitar contaminação e interferência nos resultados experimentais.

5.2 Preparação da solução:

Solução 1: extrato da amostra

70% metanol, ou seja, V metanol: V água deionizada=7:3.

5.3 Etapas de pré-tratamento da amostra:

5.3.1 Método de processamento de grãos

1) Pese 2g da amostra triturada em um tubo de centrífuga de 50ml, adicione 5ml da solução de extração da amostra, agite por 5 minutos, 4000 rpm à temperatura ambiente/10 minutos de centro de separação;

2) Pegue 0,5ml de sobrenadante, adicione 0,5ml de água deionizada e misture bem;

3) Pegue 50 µ L Análise.

Relação de diluição da amostra: 5 Limite inferior de detecção: 0,15ppb

5.3.2 Métodos de processamento para amostras com forte absorção de água, como casca de milho e farelo de trigo

1) Pese 2g da amostra triturada em um tubo de centrífuga de 50ml, adicione 20ml da solução de extração da amostra, agite por 5 minutos, 4000 rpm à temperatura ambiente/10 minutos de centro de separação;

2) Pegue 0,5ml de sobrenadante, adicione 0,5ml de água deionizada e misture bem; (Para a amostra com teor de toxina extremamente alto, ela pode ser diluída com 35% de metanol e, em seguida, testada. Por exemplo, pegue 0,1ml da solução misturada em 2) e 0,9ml de 35% de metanol para misturar. A relação final de diluição da amostra é 200 e o limite de detecção é 6ppb.)

3) Pegue 50 µ L Análise.

Relação de diluição da amostra: 20 Limite inferior de detecção: 0,6ppb

Observação: Como a distribuição da toxina na amostra é desigual, é necessário coletar amostras de vários pontos e misturá-las totalmente antes de pegar 2g para teste.

5.3.3 Método de processamento de ração balanceada

1) Pese 2g da amostra triturada em um tubo de centrífuga de 50ml, adicione 10ml da solução de extração da amostra, agite por 5 minutos, 4000 rpm à temperatura ambiente/10 minutos de centro de separação;

2) Pegue 0,5ml de sobrenadante, adicione 0,5ml de água deionizada e misture bem;

3) Pegue 50 µ L Análise.

Relação de diluição da amostra: 10 Limite inferior de detecção: 0,3ppb

5.3.4 Métodos de tratamento de ração de óleo comestível, amendoim e alto teor de gordura

1) Pese 2g da amostra triturada em um tubo de centrífuga de 50ml, adicione 8ml de n-hexano e 10ml da solução de extração da amostra, agite por 5min, 4000 rpm à temperatura ambiente/10 min de centro de separação;

2) Remova o líquido superior, pegue 0,5ml do líquido inferior e adicione 0,5ml de água deionizada, misture bem, em seguida, pegue 0,5ml do líquido misturado e adicione 0,5ml de 35% de metanol, agite por 30s;

3) Pegue 50 µ L Análise.

Relação de diluição da amostra: 20 Limite inferior de detecção: 0,6ppb

5.3.5 Alimentos ou condimentos como molhos, trigo, biscoitos, doces e métodos de processamento de ração, como concentrado de ração

1) Pese 2g da amostra triturada em um tubo de centrífuga de 50ml, adicione 10ml da solução de extração da amostra, agite por 5 minutos, 4000 rpm à temperatura ambiente/10 minutos de centro de separação;

2) Pegue 2ml de sobrenadante, adicione 4ml de triclorometano (ou diclorometano), agite por 5 minutos, 4000 rpm à temperatura ambiente/10 minutos de centro de separação;

3) Transfira o líquido superior para outro recipiente, deixe o líquido inferior em espera, adicione mais 4ml de clorofórmio (ou diclorometano) ao líquido superior, agite e misture totalmente por 5 minutos, e a temperatura ambiente é de 4000 rpm/centro de separação por 10 minutos;

4) Remova o líquido superior, combine o líquido inferior duas vezes e misture totalmente;

5) Pegue 2ml do líquido inferior combinado e seque-o sob nitrogênio a 50-60 ℃;

6) Adicione 0,5ml de extrato da amostra para dissolver totalmente a substância seca e, em seguida, adicione 0,5ml de água deionizada para misturar;

7) Pegue 50 µ L Análise.

Relação de diluição da amostra: 10 Limite inferior de detecção: 0,3ppb

5.3.6 Método de processamento de cerveja

1) Agite totalmente a cerveja (remova o CO2), pegue 2ml da amostra de cerveja, adicione 1ml de água destilada, adicione 7ml de metanol e agite por 5min;

2) Pegue 0,5ml da solução de amostra misturada e adicione 0,5ml de água deionizada para misturar bem;

3) Pegue 50 µ L Análise.

Relação de diluição da amostra: 10 Limite inferior de detecção: 0,3ppb

5.3.7 Método de tratamento de vinho, molho de soja e vinagre

1) Pegue 2ml da amostra, adicione 2ml de água destilada, adicione 10ml de triclorometano (ou diclorometano), agite por 5 minutos, 4000 rpm à temperatura ambiente/10 minutos de centro de separação;

2) Pegue 1ml do líquido inferior e seque-o sob nitrogênio a 50-60 ℃;

3) Adicione 0,5ml de extrato da amostra para dissolver totalmente a substância seca, em seguida, adicione 0,5ml de água deionizada e misture bem;

5) Pegue 50 µ L Análise.

Relação de diluição da amostra: 5 Limite inferior de detecção: 0,15ppb

6 Etapas do ELISA

Retire o reagente necessário do ambiente de armazenamento a frio de 4 ℃ e coloque-o à temperatura ambiente por mais de 30 minutos. Pode haver cristais que precisam ser restaurados à temperatura ambiente para dissolver totalmente quando a solução de lavagem estiver em armazenamento a frio. Cada reagente líquido deve ser agitado antes de usar. Retire o número necessário de placas e molduras microporosas, coloque as placas microporosas não utilizadas em sacos auto-selantes e armazene-as a 2-8 ℃.

Antes do experimento, 20 × A solução de lavagem concentrada é diluída em solução de lavagem de trabalho por 20 vezes.

6.1 Numeração: numere os poços correspondentes da amostra e do padrão em sequência, faça dois furos paralelos para cada amostra e padrão e registre a posição do furo padrão e do furo da amostra.

6.2 Reação de adição de amostra: adicione 50 µ l/poço de padrão ou amostra em seus respectivos poços, em seguida, adicione 50 µ l/poço de marcador enzimático, em seguida, adicione 50 µ l/poço de solução de trabalho de anticorpos, sele a placa com uma membrana de cobertura, agite suavemente por 5 segundos, misture e reaja a 25 ℃ por 30 minutos.

6.3 Lavagem: Remova cuidadosamente a membrana da placa de cobertura, seque o líquido no orifício, lave totalmente o orifício com solução de lavagem de trabalho 250 µ l/orifício por 5 vezes, com um intervalo de 30 segundos, e seque-o com papel absorvente (as bolhas que não são removidas após a pat podem ser perfuradas com uma ponta de pistola limpa).

6.4 Desenvolvimento de cor: adicione 50 µ l de solução de substrato A e 50 µ l de solução de substrato B a cada orifício, agite suavemente por 5 segundos e misture bem, e desenvolva a cor no escuro a 25 ℃ por 15 minutos.

6.5 Terminação: adicione 50 µ l de solução de terminação a cada orifício, agite suavemente e misture bem para terminar a reação.

6.6 Medição do valor de absorbância: use o testador de aflatoxina para medir o valor de absorbância de cada orifício a 450 nm (recomenda-se o comprimento de onda duplo 450/630 nm). A determinação deve ser concluída dentro de 10 minutos após a terminação da reação

6.7 O testador automático de aflatoxina ST-2000A conclui automaticamente a determinação e produz automaticamente os resultados.