Mức độ 3 Vibration Plate Speed ST-2000A Upgraded Fungal Toxin Tester Board

Máy đo tốc độ tấm rung cấp 3 ST-2000A nâng cấp, máy kiểm tra độc tố nấm, bảng vải hiển thị

Máy phân tích độc tố nấm ST-2000A là một thiết bị phân tích cần thiết để phát hiện aflatoxin và xét nghiệm miễn dịch liên kết enzyme. Nguyên tắc của xét nghiệm miễn dịch liên kết enzyme pha rắn (ELISA), tức là xét nghiệm miễn dịch liên kết enzyme (ELISA), được cấu tạo từ thiết bị này và bộ dụng cụ B1, có thể được sử dụng để xác định hàm lượng aflatoxin B1 và các độc tố nấm khác trong các mẫu một cách hạn chế và định lượng (nếu được trang bị các bộ dụng cụ khác, có thể phát hiện các độc tố khác). Nó được sử dụng rộng rãi trong việc phát hiện aflatoxin B1 và các độc tố nấm khác trong thực phẩm, thức ăn chăn nuôi, dầu ăn, các sản phẩm từ sữa, thuốc, đồ uống, rượu và các sản phẩm khác.

Đặc điểm hiệu suất:

1. Vận hành hiển thị: màn hình LCD màu, bảng phân phối videophone, hiển thị thông tin toàn bảng, vận hành màn hình cảm ứng

2. Chức năng tấm rung: Tốc độ tấm rung cấp 3, thời gian có thể điều chỉnh 0-255 giây

3. Trạm làm việc: phần mềm đánh dấu enzyme chuyên nghiệp, có thể lưu trữ 500 nhóm chương trình, 100000 kết quả mẫu và cung cấp các chế độ tính toán phong phú như độ hấp thụ, phương trình tuyến tính, phương trình logarit, phương trình bậc hai, phương trình bậc ba, phương trình logarit nồng độ phần trăm độ hấp thụ, hàm spline, tỷ lệ ức chế, v.v.

Thông số kỹ thuật:

Nguồn sáng: Đèn halogen nhập khẩu DC12V 22W

Phạm vi bước sóng: 400-900nm

Bộ lọc: 405, 450, 492, 630nm là tiêu chuẩn, các bước sóng khác tùy chọn

Phạm vi đọc: 0-4.000Abs

Độ phân giải: 0.001Abs

Lỗi chỉ báo: ≤± 0.01Abs

Độ ổn định: ≤± 0.003Abs

Độ lặp lại: ≤ 0.3%

Kích thước: 400mm * 260mm * 200mm

1 Nguyên tắc và ứng dụng

Bộ dụng cụ này sử dụng phương pháp ELISA cạnh tranh gián tiếp để phát hiện aflatoxin B1 (AFB1) trong ngũ cốc, thức ăn chăn nuôi và các mẫu khác. Bộ dụng cụ bao gồm tấm enzyme được tráng sẵn với kháng nguyên liên hợp, chất đánh dấu enzyme horseradish, kháng thể, tiêu chuẩn và các thuốc thử phù hợp khác. Trong quá trình thử nghiệm, thêm dung dịch tiêu chuẩn hoặc mẫu, aflatoxin B1 trong mẫu và tấm enzyme được tráng sẵn với kháng nguyên liên hợp để cạnh tranh với kháng thể kháng aflatoxin B1. Sau khi thêm chất đánh dấu enzyme, sử dụng chất nền TMB để hiện màu. Giá trị độ hấp thụ mẫu tỷ lệ nghịch với hàm lượng aflatoxin B1 có trong mẫu. Lượng aflatoxin B1 còn lại trong mẫu có thể thu được bằng cách so sánh với đường chuẩn.

2 Chỉ số kỹ thuật

2.1 Độ nhạy của bộ dụng cụ: 0.03ppb (ng/ml)

2.2 Chế độ phản ứng: 25 ℃, 30 phút ~ 15 phút

2.3 Giới hạn phát hiện thấp hơn:

Ngũ cốc...................................................... 0.15ppb

Thức ăn công thức.......................................... 0.3 ppb

Dầu ăn, đậu phộng.................................... 0.6ppb

Nước tương, lúa mì và các loại thức ăn khác.............................. 0.3 ppb

Bia.......................................... 0.3 ppb

Rượu, nước tương, giấm.................................... 0.15ppb

2.4 Tỷ lệ phản ứng chéo:

Aflatoxin B1 100%

2.5 Tỷ lệ thu hồi mẫu:

Ngũ cốc và thức ăn công thức.............................. 85% ± 15%

Đậu phộng.................................... 82 ± 15%

Dầu ăn.................................... 85 ± 15%

Nước tương, lúa mì và các loại thức ăn khác.............................. 83 ± 15%

Bia.................................... 84 ± 15%

Rượu, nước tương, giấm............ 87 ± 15%

3 Thành phần bộ dụng cụ

Tấm đánh dấu enzyme.................................... 96 lỗ

Dung dịch tiêu chuẩn (nắp đen): 1ml mỗi loại

0ppb,0.03ppb,0.06ppb,0.12ppb,0.24ppb,0.48ppb

Dung dịch tiêu chuẩn cao: 100ppb.............................. 1ml

Chất đánh dấu enzyme (nắp đỏ).............................. 5.5ml

Dung dịch làm việc kháng thể (nắp xanh).............................. 5.5ml

Dung dịch chất nền A (nắp trắng).............................. 6ml

Chất lỏng nền B (nắp đen).............................. 6ml

Dung dịch kết thúc (nắp vàng).............................. 6ml

Dung dịch rửa cô đặc 20X (nắp trắng)..................... 40ml

Hướng dẫn sử dụng.....................1 bản

4 Thiết bị và thuốc thử cần thiết

4.1 Thiết bị: máy kiểm tra aflatoxin, máy in, máy đồng nhất, thiết bị sấy nitơ, máy lắc, máy ly tâm, pipet có vạch chia, cân (độ nhạy 0.01g)

4.2 Micro-pipet: kênh đơn 20 µ l-200 µ l, 100 µ l-1000 µ l, đa kênh 300 µ l

4.3 Thuốc thử: methanol, n-hexan, triclorometan hoặc diclorometan

5 Xử lý sơ bộ mẫu

5.1 Hướng dẫn trước khi xử lý mẫu:

Thiết bị thí nghiệm phải sạch và sử dụng đầu hút dùng một lần để tránh nhiễm bẩn và can thiệp vào kết quả thí nghiệm.

5.2 Chuẩn bị dung dịch:

Dung dịch 1: chiết xuất mẫu

70% methanol, tức là V methanol: V nước khử ion=7:3.

5.3 Các bước xử lý sơ bộ mẫu:

5.3.1 Phương pháp xử lý ngũ cốc

1) Cân 2g mẫu nghiền vào ống ly tâm 50ml, thêm 5ml dung dịch chiết mẫu, lắc trong 5 phút, 4000 vòng/phút ở nhiệt độ phòng/10 phút ly tâm;

2) Lấy 0.5ml dịch nổi, thêm 0.5ml nước khử ion và trộn đều;

3) Lấy 50 μ L Phân tích.

Tỷ lệ pha loãng mẫu: 5 Giới hạn phát hiện thấp hơn: 0.15ppb

5.3.2 Phương pháp xử lý các mẫu có khả năng hấp thụ nước mạnh như vỏ ngô và cám mì

1) Cân 2g mẫu nghiền vào ống ly tâm 50ml, thêm 20ml dung dịch chiết mẫu, lắc trong 5 phút, 4000 vòng/phút ở nhiệt độ phòng/10 phút ly tâm;

2) Lấy 0.5ml dịch nổi, thêm 0.5ml nước khử ion và trộn đều; (Đối với mẫu có hàm lượng độc tố cực cao, có thể pha loãng bằng 35% methanol rồi thử nghiệm. Ví dụ, lấy 0.1ml dung dịch hỗn hợp trong 2) và 0.9ml 35% methanol để trộn. Tỷ lệ pha loãng mẫu cuối cùng là 200 và giới hạn phát hiện là 6ppb.)

3) Lấy 50 μ L Phân tích.

Tỷ lệ pha loãng mẫu: 20 Giới hạn phát hiện thấp hơn: 0.6ppb

Lưu ý: Do sự phân bố độc tố trong mẫu không đồng đều nên cần lấy mẫu từ nhiều điểm và trộn đều trước khi lấy 2g để thử nghiệm.

5.3.3 Phương pháp xử lý thức ăn công thức

1) Cân 2g mẫu nghiền vào ống ly tâm 50ml, thêm 10ml dung dịch chiết mẫu, lắc trong 5 phút, 4000 vòng/phút ở nhiệt độ phòng/10 phút ly tâm;

2) Lấy 0.5ml dịch nổi, thêm 0.5ml nước khử ion và trộn đều;

3) Lấy 50 μ L Phân tích.

Tỷ lệ pha loãng mẫu: 10 Giới hạn phát hiện thấp hơn: 0.3ppb

5.3.4 Phương pháp xử lý thức ăn chăn nuôi bằng dầu ăn, đậu phộng và chất béo cao

1) Cân 2g mẫu nghiền vào ống ly tâm 50ml, thêm 8ml n-hexan và 10ml dung dịch chiết mẫu, lắc trong 5 phút, 4000 vòng/phút ở nhiệt độ phòng/10 phút ly tâm;

2) Loại bỏ chất lỏng phía trên, lấy 0.5ml chất lỏng phía dưới và thêm 0.5ml nước khử ion, trộn đều, sau đó lấy 0.5ml chất lỏng hỗn hợp và thêm 0.5ml 35% methanol, lắc trong 30 giây;

3) Lấy 50 μ L Phân tích.

Tỷ lệ pha loãng mẫu: 20 Giới hạn phát hiện thấp hơn: 0.6ppb

5.3.5 Thực phẩm hoặc gia vị như nước sốt, lúa mì, bánh quy, bánh ngọt và phương pháp xử lý thức ăn chăn nuôi như thức ăn chăn nuôi cô đặc

1) Cân 2g mẫu nghiền vào ống ly tâm 50ml, thêm 10ml dung dịch chiết mẫu, lắc trong 5 phút, 4000 vòng/phút ở nhiệt độ phòng/10 phút ly tâm;

2) Lấy 2ml dịch nổi, thêm 4ml triclorometan (hoặc diclorometan), lắc trong 5 phút, 4000 vòng/phút ở nhiệt độ phòng/10 phút ly tâm;

3) Chuyển chất lỏng phía trên sang một thùng chứa khác, để chất lỏng phía dưới ở chế độ chờ, thêm 4ml cloroform (hoặc diclorometan) vào chất lỏng phía trên, lắc và trộn đều trong 5 phút và nhiệt độ phòng là 4000 vòng/phút/ly tâm trong 10 phút;

4) Loại bỏ chất lỏng phía trên, kết hợp chất lỏng phía dưới hai lần và trộn đều;

5) Lấy 2ml chất lỏng phía dưới kết hợp và thổi khô dưới nitơ 50-60 ℃;

6) Thêm 0.5ml chiết xuất mẫu để hòa tan hoàn toàn chất khô, sau đó thêm 0.5ml nước khử ion để trộn;

7) Lấy 50 μ L Phân tích.

Tỷ lệ pha loãng mẫu: 10 Giới hạn phát hiện thấp hơn: 0.3ppb

5.3.6 Phương pháp xử lý bia

1) Khuấy đều bia (loại bỏ CO2), lấy 2ml mẫu bia, thêm 1ml nước cất, thêm 7ml methanol và lắc trong 5 phút;

2) Lấy 0.5ml dung dịch mẫu hỗn hợp và thêm 0.5ml nước khử ion để trộn đều;

3) Lấy 50 μ L Phân tích.

Tỷ lệ pha loãng mẫu: 10 Giới hạn phát hiện thấp hơn: 0.3ppb

5.3.7 Phương pháp xử lý rượu, nước tương và giấm

1) Lấy 2ml mẫu, thêm 2ml nước cất, thêm 10ml triclorometan (hoặc diclorometan), lắc trong 5 phút, 4000 vòng/phút ở nhiệt độ phòng/10 phút ly tâm;

2) Lấy 1ml chất lỏng phía dưới và thổi khô dưới nitơ 50-60 ℃;

3) Thêm 0.5ml chiết xuất mẫu để hòa tan hoàn toàn chất khô, sau đó thêm 0.5ml nước khử ion và trộn đều;

5) Lấy 50 μ L Phân tích.

Tỷ lệ pha loãng mẫu: 5 Giới hạn phát hiện thấp hơn: 0.15ppb

6 Các bước của ELISA

Lấy thuốc thử cần thiết ra khỏi môi trường bảo quản lạnh 4 ℃ và để ở nhiệt độ phòng trong hơn 30 phút. Có thể có các tinh thể cần được phục hồi về nhiệt độ phòng để hòa tan hoàn toàn khi dung dịch rửa được bảo quản lạnh. Mỗi thuốc thử lỏng phải được lắc trước khi sử dụng. Lấy ra số lượng tấm và khung microporous cần thiết, cho các tấm microporous chưa sử dụng vào túi tự niêm phong và bảo quản ở 2-8 ℃.

Trước khi thí nghiệm, 20 × Dung dịch rửa cô đặc được pha loãng thành dung dịch rửa làm việc 20 lần.

6.1 Đánh số: đánh số các giếng tương ứng của mẫu và tiêu chuẩn theo thứ tự, tạo hai lỗ song song cho mỗi mẫu và tiêu chuẩn và ghi lại vị trí của lỗ tiêu chuẩn và lỗ mẫu.

6.2 Phản ứng thêm mẫu: thêm 50 µ l/giếng tiêu chuẩn hoặc mẫu vào các giếng tương ứng của chúng, sau đó thêm 50 µ l/giếng chất đánh dấu enzyme, sau đó thêm 50 µ l/giếng dung dịch làm việc kháng thể, bịt kín tấm bằng màng phủ, lắc nhẹ trong 5 giây, trộn và phản ứng ở 25 ℃ trong 30 phút.

6.3 Rửa: Cẩn thận loại bỏ màng phủ, làm khô chất lỏng trong lỗ, rửa sạch lỗ bằng dung dịch rửa làm việc 250 µ l/lỗ trong 5 lần, với khoảng thời gian 30 giây và thấm khô bằng giấy thấm (các bọt không được loại bỏ sau khi thấm có thể được đâm bằng đầu súng sạch).

6.4 Hiện màu: thêm 50 µ l dung dịch chất nền A và 50 µ l dung dịch chất nền B vào mỗi lỗ, lắc nhẹ trong 5 giây và trộn đều, và hiện màu trong bóng tối ở 25 ℃ trong 15 phút.

6.5 Kết thúc: thêm 50 µ l dung dịch kết thúc vào mỗi lỗ, lắc nhẹ và trộn đều để kết thúc phản ứng.

6.6 Đo giá trị độ hấp thụ: sử dụng máy kiểm tra aflatoxin để đo giá trị độ hấp thụ của mỗi lỗ ở 450 nm (khuyến nghị bước sóng kép 450/630 nm). Việc xác định phải được hoàn thành trong vòng 10 phút sau khi phản ứng kết thúc

6.7 Máy kiểm tra aflatoxin tự động ST-2000A tự động hoàn thành việc xác định và tự động tạo ra kết quả.