لوحة اهتزازية من المستوى 3 سرعة ST-2000A مطورة لاختبار السموم الفطرية لوحة قماشية مرئية

مستوى 3 سرعة اللوحة الاهتزازية ST-2000A اختبار سموم الفطريات المحسنة، لوحة قماش مرئية

تحليل الميكوتوكسين ST-2000A هو أداة تحليلية ضرورية لتحليل الأفلاتوكسين والمنشط المناعي المرتبط بالأنزيم.وهي اختبار الإمتصاص المناعي المرتبط بالأنزيمات (ELISA)، يتكون من هذا الجهاز ومجموعة B1،والتي يمكن استخدامها لتحديد محتوى الأفلاتوكسين B1 وغيره من الميكوتوكسينات في العينات بطريقة محدودة وكمية (إذا كانت مجهزة بمجموعات أخرى)، يمكن الكشف عن سموم أخرى). يستخدم على نطاق واسع في الكشف عن الأفلاتوكسين B1 وغيرها من السموم النووية في الأغذية والمواد الغذائية والزيوت ومنتجات الألبان والأدوية والمشروبات والنبيذ وغيرها من المنتجات.

خصائص الأداء:

1تشغيل الشاشة: شاشة LCD ملونة، لوحة توزيع فيديوفون، عرض معلومات اللوحة بأكملها، تشغيل الشاشة اللمسية

2وظيفة لوحة الاهتزاز: مستوى 3 سرعة لوحة الاهتزاز، وقت 0-255 ثانية قابلة للتعديل

3محطة عمل: برنامج مؤشر إنزيمات محترف، يمكنه تخزين 500 مجموعة من البرامج، و 100000 نتيجة عينة، وتوفير أوضاع حساب غنية مثل الامتصاص، المعادلة الخطية،المعادلة اللوغاريتمية، المعادلة التربيعية، المعادلة الكوبية، الامتصاص النسبة المئوية-تركيز المعادلة اللوغاريتمية، وظيفة spline، معدل التثبيط، الخ

المعلمات التقنية:

مصدر الضوء: مصباح الهالوجين المستورد DC12V 22W

نطاق طول الموجة: 400-900nm

مرشح: 405، 450، 492، 630nm كقياس، أطوال موجة أخرى اختيارية

نطاق القراءة: 0-4.000Abs

الدقة: 0.001Abs

خطأ الإشارة: ≤ ± 0.01Abs

الاستقرار: ≤ ± 0.003Abs

قابلية التكرار: ≤ 0.3%

الحجم: 400mm * 260mm * 200mm

1 المبدأ والتطبيق

تستخدم هذه المجموعة طريقة ELISA التنافسية غير المباشرة للكشف عن الأفلاتوكسين B1 (AFB1) في الحبوب والمواد الغذائية وغيرها من العينات. تتكون المجموعة من لوحة ملصقة بالأنزيمات ومغطاة مسبقًا بمضاد الارتباط ،مؤشر إنزيم الحشيش، الأجسام المضادة، والمقاييس وغيرها من المفاعلات المتطابقة. أثناء الاختبار، أضف محلول القياس أو العينة،يتم تغطية الأفلاتوكسين B1 في العينة والصفيحة الإنزيمية مسبقاً بالمضاد المتزامن للتنافس على الأجسام المضادة للأفلاتوكسين B1بعد إضافة علامة الإنزيم، استخدم الركيزة TMB لتطوير اللون. يتم ارتباط قيمة امتصاص العينة بشكل سلبي مع محتوى الأفلاتوكسين B1 الموجود في العينة.يمكن الحصول على الكمية المتبقية من الأفلاتوكسين B1 في العينة عن طريق المقارنة مع المنحنى القياسي.

2 مؤشرات فنية

2.1 حساسية الحزمة: 0.03ppb (ng/ml)

2.2 وضع التفاعل: 25 درجة مئوية، 30 دقيقة ~ 15 دقيقة

2.3 الحد الأدنى للكشف:

الحبوب: 0.15 جزء

الغذاء الصناعي 0.3 ppb

زيت غذائي، فول سوداني 0.6ppb

صلصة الصويا والقمح وغيرها من العلف

البيرة 0.3 ppb

النبيذ، صلصة الصويا، الخل

2.4 معدل رد الفعل المتقاطع:

الأفلاتوكسين B1 100%

2.5 معدل استرداد العينات:

الحبوب والمواد الغذائية المعدلة للفطائر 85% ± 15%

الفول السوداني 82 ± 15%

زيت صالح للأكل 85 ± 15%

صلصة الصويا والقمح وغيرها من الأعلاف 83 ± 15%

البيرة 84 ± 15%

النبيذ، صلصة الصويا، الخل 87 ± 15%

3 تكوين الحزمة

لوحة مؤشر الإنزيمات 96 فتحة

محلول قياسي (غلاف أسود): 1 مل لكل واحد

0ppb،0.03ppb0.06ppb0.12ppb،0.24ppb0.48ppb

محلول قياسي عالي: 100ppb 1ml

مؤشر الإنزيمات (القناع الأحمر) 5.5 مل

محلول عمل الأجسام المضادة (كوب أزرق) 5.5 مل

محلول الركيزة A (الكبّة البيضاء) 6 مل

السائل B (غلاف أسود) 6 مل

محلول الإنهاء (الكأس الصفراء) 6 مل

20X محلول غسيل مركز (غطاء أبيض) 40 مل

دليل الاستخدام 1 نسخة

4 المعدات والفاعلات المطلوبة

4.1 الأجهزة: اختبار الأفلاتوكسينات، الطابعة، المنسجم، جهاز تجفيف النيتروجين، المذبذب، الطرد المركزي، البيبيتة المتدرجة، الميزان (حساسية 0.01g)

4.2 الميكرو-بيبيت: قناة واحدة 20 ميكرو لتر-200 ميكرو لتر، 100 ميكرو لتر-1000 ميكرو لتر، متعددة القنوات 300 ميكرو لتر

4.3 المفاعل: الميثانول، الن - هيكسان، التريكلوروميثان أو الديكلوروميثان

5 المعالجة المسبقة للعينات

5.1 تعليمات قبل معالجة العينات:

يجب أن تكون الأجهزة التجريبية نظيفة وأن تستخدم رأس امتصاص قابلة للإستخدام لمرة واحدة لتجنب التلوث والتدخل في نتائج التجربة.

5.2 تحضير المحلول:

الحل 1: استخراج العينة

70٪ من الميثانول، أي V الميثانول: V الماء غير المؤين=7:3.

5.3 خطوات المعالجة المسبقة للعينة:

5.3.1 طريقة معالجة الحبوب

1) يزن 2 غرام من العينة المسحوقة في أنبوب طرد مركزي 50 مل، ويضيف 5 مل من محلول استخراج العينة، ويهز لمدة 5 دقائق، 4000 دورة في الدقيقة في درجة حرارة الغرفة/10 دقائق من مركز الفصل.

2) خذ 0.5 مل من المادة الممتلئة، أضف 0.5 مل من المياه المهجورة، وخلط جيدا.

3) خذ 50 ميكرو لتر تحليل.

نسبة تخفيف العينة: 5 الحد الأدنى للكشف: 0.15ppb

5.3.2 أساليب معالجة العينات ذات امتصاص الماء القوي مثل قشرة الذرة وقصب القمح

1) يزن 2 غرام من العينة المسحوقة في أنبوب طرد مركزي 50 مل، ويضيف 20 مل من محلول استخراج العينة، ويهز لمدة 5 دقائق، 4000 دورة في الدقيقة في درجة حرارة الغرفة/10 دقائق من مركز الفصل.

2) خذ 0.5 مل من المضاد الفوقي، وأضف 0.5 مل من الماء غير المؤين، وخلط جيدا؛ (للمعينة مع محتوى سموم عالية للغاية، يمكن تخفيفها مع 35٪ الميثانول ثم اختبار. على سبيل المثال، خذ 0.1 مل من المحلول المختلط في 2) و 0.9 مل من الميثانول بنسبة 35٪ للخلط. نسبة تخفيف العينة النهائية هي 200، والحد الأقصى للكشف هو 6ppb.)

3) خذ 50 ميكرو لتر تحليل.

نسبة تخفيف العينة: 20 الحد الأدنى للكشف: 0.6ppb

ملاحظة: نظرًا لأن توزيع السم في العينة غير متساو، فمن الضروري أخذ عينات من نقاط متعددة ومزجها تمامًا قبل أخذ 2 غرام للاختبار.

5.3.3 طريقة معالجة الغذاء

1) يزن 2 غرام من العينة المسحوقة في أنبوب طرد مركزي 50 مل، ويضيف 10 مل من محلول استخراج العينة، ويهز لمدة 5 دقائق، 4000 دورة في الدقيقة في درجة حرارة الغرفة/10 دقائق من مركز الفصل.

2) خذ 0.5 مل من المادة الممتلئة، أضف 0.5 مل من المياه المهجورة، وخلط جيدا.

3) خذ 50 ميكرو لتر تحليل.

نسبة تخفيف العينة: 10 الحد الأدنى للكشف: 0.3ppb

5.3.4 طرق معالجة تغذية الزيوت الصالحة للأكل والفول السوداني والغنية بالدهون

1) يزن 2 غرام من العينة المسحوقة في أنبوب طرد مركزي 50 مل، يضيف 8 مل من n-hexane و 10 مل من محلول استخراج العينة، يضرب لمدة 5 دقيقة، 4000 دورة في الدقيقة في درجة حرارة الغرفة/10 دقيقة من مركز الفصل.

2) إزالة السائل العلوي، واتخاذ 0.5ml من السائل السفلي وإضافة 0.5ml من الماء غير المؤين، خلط جيدا، ثم تأخذ 0.5ml من السائل المختلط وإضافة 0.5ml من الميثانول 35٪، هز لمدة 30s.

3) خذ 50 ميكرو لتر تحليل.

نسبة تخفيف العينة: 20 الحد الأدنى للكشف: 0.6ppb

5.3.5 الأطعمة أو التوابل مثل الصلصات والقمح والبسكويت والمعجنات وطرق معالجة الأغذية مثل تركيز الأغذية

1) يزن 2 غرام من العينة المسحوقة في أنبوب طرد مركزي 50 مل، ويضيف 10 مل من محلول استخراج العينة، ويهز لمدة 5 دقائق، 4000 دورة في الدقيقة في درجة حرارة الغرفة/10 دقائق من مركز الفصل.

2) خذ 2 مل من المادة الممتلئة، وأضف 4 مل من الثلاثي الكلور الميثان (أو الثنائي الكلور الميثان) ، هز لمدة 5 دقائق، 4000 دورة في الدقيقة في درجة حرارة الغرفة / 10 دقائق من مركز الفصل.

3) نقل السائل العلوي إلى حاوية أخرى، وترك السائل السفلي في حالة تأهب، إضافة 4 مل من الكلوروفورم (أو ديكلورميثان) إلى السائل العلوي، هز تماما وخلط لمدة 5 دقائق.ودرجة حرارة الغرفة 4000 دورة في الدقيقة / مركز الفصل لمدة 10 دقائق;

4) إزالة السائل العلوي، ومزج السائل السفلي مرتين ومزج تماما.

5) خذ 2 مل من السائل السفلي المجمّع واصفعيه ليجف تحت 50-60 درجة مئوية من النيتروجين.

6) إضافة 0.5 مل من مستخلص العينة لإذابة المادة المجففة بالكامل، ثم إضافة 0.5 مل من الماء غير المؤين للخلط.

7) خذ 50 ميكرو لتر للتحليل.

نسبة تخفيف العينة: 10 الحد الأدنى للكشف: 0.3ppb

5.3.6 طريقة معالجة البيرة

1) قم بإثارة البيرة بالكامل (إزالة CO2) ، خذ 2 مل من عينة البيرة ، أضف 1 مل من الماء المقطر ، أضف 7 مل من الميثانول ، واهز لمدة 5 دقائق.

2) خذ 0.5 مل من محلول العينة المختلطة وأضف 0.5 مل من الماء غير المؤين لخلطها جيدا.

3) خذ 50 ميكرو لتر تحليل.

نسبة تخفيف العينة: 10 الحد الأدنى للكشف: 0.3ppb

5.3.7 طريقة معالجة النبيذ وصلصة الصويا والخل

1) أخذ 2 مل من العينة، إضافة 2 مل من المياه المقطرة، إضافة 10 مل من تريكلورميثان (أو ديكلورميثان) ، هز لمدة 5 دقائق، 4000 دورة في الدقيقة في درجة حرارة الغرفة/10 دقائق من مركز الفصل.

2) خذ 1 مل من السائل السفلي واصفعها لتجف تحت 50-60 درجة مئوية من النيتروجين.

3) إضافة 0.5 مل من مستخلص العينة لإذابة المادة المجففة بالكامل، ثم إضافة 0.5 مل من الماء غير المؤين، وخلط جيدا.

5) خذ 50 ميكرو لتر من التحليل.

نسبة تخفيف العينة: 5 الحد الأدنى للكشف: 0.15ppb

6 خطوات لـ ELISA

أخرج المفاعل المطلوب من بيئة التخزين البارد في درجة حرارة 4 درجة مئوية ووضعها في درجة حرارة الغرفة لمدة تزيد عن 30 دقيقة.قد تكون هناك بلورات تحتاج إلى استعادة إلى درجة حرارة الغرفة لذوبان تماما عندما محلول الغسيل هو تخزين بارديجب أن يتم هز كل مادة تجريبية سائلة قبل الاستخدام، واستخرج العدد المطلوب من الألواح والإطارات الميكروبورية، ووضع الألواح الميكروبورية غير المستخدمة في أكياس مغلقة ذاتيا، وتخزينها عند 2-8 درجة مئوية.

قبل التجربة، 20 × يتم تخفيف محلول الغسيل المركز إلى محلول غسيل عمل بمقدار 20 مرة.

6.1 الرقمنة: رقم الآبار المقابلة للعينة والمعيار بالتسلسل، وجعل ثقبين متوازين لكل عينة ومعيار، وتسجيل موقع الثقب القياسي والثقب العين..

6.2 تفاعل إضافة العينة: إضافة 50 ميكرو لتر/برة من العينة القياسية أو العينة إلى الآبار الخاصة بهم، ثم إضافة 50 ميكرو لتر/برة من علامة الإنزيم، ثم إضافة 50 ميكرو لتر/برة من محلول عمل الأجسام المضادة،أغلق اللوحة بشريط لوحة الغطاء، هز بهدوء لمدة 5 ثواني، وخلط، وتفاعل عند 25 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.

6.3 الغسل: إزالة غشاء لوحة الغطاء بعناية، وجفاف السائل في الثقب، وغسل الثقب بالكامل بمحلول غسيل عمل 250 ميكرو لتر لكل ثقب لمدة 5 مرات، مع فترة 30 ثانية،وتطعيمه جاف مع الورق الممتص (الفقاعات التي لا يتم إزالتها بعد التطعيم يمكن ثقبها مع رأس بندقية نظيفة).

6.4 تطوير اللون: إضافة 50 ميكرو لتر من محلول الركيزة A و 50 ميكرو لتر من محلول الركيزة B إلى كل فتحة، هز بهدوء لمدة 5 ثوان وخلط جيدا، وتطوير اللون في الظلام عند 25 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة.

6.5 الإنهاء: إضافة 50 ميكرو لتر من محلول الإنهاء إلى كل فتحة، هز بهدوء وخلط جيدا لإنهاء التفاعل.

6.6 قياس قيمة امتصاص: استخدم جهاز اختبار الأفلاتوكسين لقياس قيمة امتصاص كل فتحة عند 450 نانومتر (يتم التوصية بطول موجة مزدوج 450/630 نانومتر).يجب إكمال التحديد خلال 10 دقائق بعد انتهاء التفاعل

6.7 يكتمل جهاز ST-2000A الآلي لتحديد الأفلاتوكسين تحديد الأفلاتوكسين تلقائيًا ويؤتي النتائج تلقائيًا