Niveau 3 Vitesse de plaque vibrante ST-2000A Testeur de toxines fongiques amélioré Tableau de tissu visible

Testeur de toxines fongiques amélioré ST-2000A de plaque vibrante de niveau 3, carte de tissu visible

L'analyseur de mycotoxines ST-2000A est un instrument analytique nécessaire pour la détection de l'aflatoxine et le dosage immuno-enzymatique. Le principe du dosage immuno-enzymatique en phase solide (ELISA), à savoir le dosage immuno-enzymatique (ELISA), est composé de cet instrument et du kit B1, qui peut être utilisé pour déterminer la teneur en aflatoxine B1 et autres mycotoxines dans les échantillons de manière limitée et quantitative (si équipé d'autres kits, d'autres toxines peuvent être détectées). Il est largement utilisé dans la détection de l'aflatoxine B1 et d'autres mycotoxines dans les aliments, les aliments pour animaux, l'huile, les produits laitiers, les médicaments, les boissons, le vin et autres produits.

Caractéristiques de performance :

1. Fonctionnement de l'affichage : écran LCD couleur, carte de distribution de visiophone, affichage des informations de l'ensemble de la carte, fonctionnement de l'écran tactile

2. Fonction de la plaque vibrante : vitesse de la plaque vibrante de niveau 3, temps réglable de 0 à 255 secondes

3. Poste de travail : logiciel professionnel de marquage enzymatique, qui peut stocker 500 groupes de programmes, 100 000 résultats d'échantillons et fournir de riches modes de calcul tels que l'absorbance, l'équation linéaire, l'équation logarithmique, l'équation quadratique, l'équation cubique, l'équation logarithmique de pourcentage de concentration d'absorbance, la fonction spline, le taux d'inhibition, etc.

Paramètres techniques :

Source de lumière : lampe halogène importée DC12V 22W

Plage de longueurs d'onde : 400-900 nm

Filtre : 405, 450, 492, 630 nm en standard, autres longueurs d'onde en option

Plage de lecture : 0-4,000Abs

Résolution : 0,001Abs

Erreur d'indication : ≤± 0,01Abs

Stabilité : ≤± 0,003Abs

Répétabilité : ≤ 0,3 %

Taille : 400 mm * 260 mm * 200 mm

1 Principe et application

Ce kit utilise la méthode ELISA compétitive indirecte pour détecter l'aflatoxine B1 (AFB1) dans les céréales, les aliments pour animaux et autres échantillons. Le kit est composé d'une plaque marquée par enzyme pré-enduite avec un antigène de couplage, un marqueur de peroxydase de raifort, un anticorps, un étalon et d'autres réactifs correspondants. Pendant le test, ajoutez l'étalon ou la solution d'échantillon, l'aflatoxine B1 dans l'échantillon et la plaque enzymatique sont pré-enduites avec l'antigène conjugué pour concurrencer l'anticorps anti-aflatoxine B1. Après avoir ajouté le marqueur enzymatique, utilisez le substrat TMB pour développer la couleur. La valeur d'absorbance de l'échantillon est inversement corrélée à la teneur en aflatoxine B1 contenue dans l'échantillon. La quantité résiduelle d'aflatoxine B1 dans l'échantillon peut être obtenue en comparant avec la courbe étalon.

2 Indicateurs techniques

2.1 Sensibilité du kit : 0,03 ppb (ng/ml)

2.2 Mode de réaction : 25 °C, 30 min ~ 15 min

2.3 Limite inférieure de détection :

Céréales...................................................... 0,15 ppb

Aliments composés.......................................... 0,3 ppb

Huile comestible, cacahuète.................................... 0,6 ppb

Sauce soja, blé et autres aliments.............................. 0,3 ppb

Bière.......................................... 0,3 ppb

Vin, sauce soja, vinaigre.................................... 0,15 ppb

2.4 Taux de réaction croisée :

Aflatoxine B1 100 %

2.5 Taux de récupération de l'échantillon :

Céréales et aliments composés.............................. 85 % ± 15 %

Cacahuète.................................... 82 ± 15 %

Huile comestible.................................... 85 ± 15 %

Sauce soja, blé et autres aliments.............................. 83 ± 15 %

Bière.................................... 84 ± 15 %

Vin, sauce soja, vinaigre............ 87 ± 15 %

3 Composition du kit

Plaque de marquage enzymatique.................................... 96 trous

Solution étalon (couvercle noir) : 1 ml chacun

0 ppb, 0,03 ppb, 0,06 ppb, 0,12 ppb, 0,24 ppb, 0,48 ppb

Solution étalon élevée : 100 ppb.............................. 1 ml

Marqueur enzymatique (bouchon rouge).............................. 5,5 ml

Solution de travail d'anticorps (bouchon bleu).............................. 5,5 ml

Solution de substrat A (bouchon blanc).............................. 6 ml

Liquide de substrat B (couvercle noir).............................. 6 ml

Solution de terminaison (bouchon jaune).............................. 6 ml

Solution de lavage concentrée 20X (couvercle blanc)..................... 40 ml

Mode d'emploi.....................1 exemplaire

4 Équipement et réactifs requis

4.1 Appareils : testeur d'aflatoxine, imprimante, homogénéisateur, dispositif de séchage à l'azote, oscillateur, centrifugeuse, pipette graduée, balance (sensibilité 0,01 g)

4.2 Micro-pipette : monocanal 20 µ l-200 µ l, 100 µ l-1000 µ l, multicanal 300 µ l

4.3 Réactif : méthanol, n-hexane, trichlorométhane ou dichlorométhane

5 Prétraitement de l'échantillon

5.1 Instructions avant le traitement de l'échantillon :

L'appareil expérimental doit être propre et utiliser une tête d'aspiration jetable pour éviter la contamination et les interférences avec les résultats expérimentaux.

5.2 Préparation de la solution :

Solution 1 : extrait d'échantillon

Méthanol à 70 %, c'est-à-dire V méthanol : V eau désionisée=7:3.

5.3 Étapes de prétraitement de l'échantillon :

5.3.1 Méthode de traitement des grains

1) Peser 2 g d'échantillon broyé dans un tube à centrifuger de 50 ml, ajouter 5 ml de solution d'extraction d'échantillon, agiter pendant 5 minutes, 4000 tr/min à température ambiante/10 minutes de centre de séparation ;

2) Prélever 0,5 ml de surnageant, ajouter 0,5 ml d'eau désionisée et bien mélanger ;

3) Prélever 50 µ L Analyse.

Rapport de dilution de l'échantillon : 5 Limite inférieure de détection : 0,15 ppb

5.3.2 Méthodes de traitement des échantillons à forte absorption d'eau tels que les enveloppes de maïs et le son de blé

1) Peser 2 g d'échantillon broyé dans un tube à centrifuger de 50 ml, ajouter 20 ml de solution d'extraction d'échantillon, agiter pendant 5 minutes, 4000 tr/min à température ambiante/10 minutes de centre de séparation ;

2) Prélever 0,5 ml de surnageant, ajouter 0,5 ml d'eau désionisée et bien mélanger ; (Pour l'échantillon avec une teneur en toxines extrêmement élevée, il peut être dilué avec du méthanol à 35 % puis testé. Par exemple, prélever 0,1 ml de la solution mélangée en 2) et 0,9 ml de méthanol à 35 % pour mélanger. Le rapport de dilution final de l'échantillon est de 200 et la limite de détection est de 6 ppb.)

3) Prélever 50 µ L Analyse.

Rapport de dilution de l'échantillon : 20 Limite inférieure de détection : 0,6 ppb

Remarque : Étant donné que la répartition de la toxine dans l'échantillon est inégale, il est nécessaire de prélever des échantillons à partir de plusieurs points et de les mélanger complètement avant d'en prélever 2 g pour le test.

5.3.3 Méthode de traitement des aliments composés

1) Peser 2 g d'échantillon broyé dans un tube à centrifuger de 50 ml, ajouter 10 ml de solution d'extraction d'échantillon, agiter pendant 5 minutes, 4000 tr/min à température ambiante/10 minutes de centre de séparation ;

2) Prélever 0,5 ml de surnageant, ajouter 0,5 ml d'eau désionisée et bien mélanger ;

3) Prélever 50 µ L Analyse.

Rapport de dilution de l'échantillon : 10 Limite inférieure de détection : 0,3 ppb

5.3.4 Méthodes de traitement des aliments pour animaux d'huile comestible, d'arachide et de matières grasses

1) Peser 2 g d'échantillon broyé dans un tube à centrifuger de 50 ml, ajouter 8 ml de n-hexane et 10 ml de solution d'extraction d'échantillon, agiter pendant 5 minutes, 4000 tr/min à température ambiante/10 minutes de centre de séparation ;

2) Retirer le liquide supérieur, prélever 0,5 ml du liquide inférieur et ajouter 0,5 ml d'eau désionisée, bien mélanger, puis prélever 0,5 ml du liquide mélangé et ajouter 0,5 ml de méthanol à 35 %, agiter pendant 30 s ;

3) Prélever 50 µ L Analyse.

Rapport de dilution de l'échantillon : 20 Limite inférieure de détection : 0,6 ppb

5.3.5 Aliments ou condiments tels que les sauces, le blé, les biscuits, les pâtisseries et les méthodes de traitement des aliments pour animaux tels que les concentrés d'aliments pour animaux

1) Peser 2 g d'échantillon broyé dans un tube à centrifuger de 50 ml, ajouter 10 ml de solution d'extraction d'échantillon, agiter pendant 5 minutes, 4000 tr/min à température ambiante/10 minutes de centre de séparation ;

2) Prélever 2 ml de surnageant, ajouter 4 ml de trichlorométhane (ou de dichlorométhane), agiter pendant 5 minutes, 4000 tr/min à température ambiante/10 minutes de centre de séparation ;

3) Transférer le liquide supérieur dans un autre récipient, laisser le liquide inférieur en attente, ajouter encore 4 ml de chloroforme (ou de dichlorométhane) au liquide supérieur, agiter et mélanger complètement pendant 5 minutes, et la température ambiante est de 4000 tr/min/centre de séparation pendant 10 minutes ;

4) Retirer le liquide supérieur, combiner le liquide inférieur deux fois et mélanger complètement ;

5) Prélever 2 ml du liquide inférieur combiné et le sécher à l'azote à 50-60 °C ;

6) Ajouter 0,5 ml d'extrait d'échantillon pour dissoudre complètement la substance séchée, puis ajouter 0,5 ml d'eau désionisée pour mélanger ;

7) Prélever 50 µ L Analyse.

Rapport de dilution de l'échantillon : 10 Limite inférieure de détection : 0,3 ppb

5.3.6 Méthode de traitement de la bière

1) Bien agiter la bière (retirer le CO2), prélever 2 ml d'échantillon de bière, ajouter 1 ml d'eau distillée, ajouter 7 ml de méthanol et agiter pendant 5 minutes ;

2) Prélever 0,5 ml de solution d'échantillon mélangée et ajouter 0,5 ml d'eau désionisée pour bien mélanger ;

3) Prélever 50 µ L Analyse.

Rapport de dilution de l'échantillon : 10 Limite inférieure de détection : 0,3 ppb

5.3.7 Méthode de traitement du vin, de la sauce soja et du vinaigre

1) Prélever 2 ml d'échantillon, ajouter 2 ml d'eau distillée, ajouter 10 ml de trichlorométhane (ou de dichlorométhane), agiter pendant 5 minutes, 4000 tr/min à température ambiante/10 minutes de centre de séparation ;

2) Prélever 1 ml du liquide inférieur et le sécher à l'azote à 50-60 °C ;

3) Ajouter 0,5 ml d'extrait d'échantillon pour dissoudre complètement la substance séchée, puis ajouter 0,5 ml d'eau désionisée et bien mélanger ;

5) Prélever 50 µ L Analyse.

Rapport de dilution de l'échantillon : 5 Limite inférieure de détection : 0,15 ppb

6 Étapes de l'ELISA

Sortez le réactif requis de l'environnement de stockage à froid à 4 °C et placez-le à température ambiante pendant plus de 30 minutes. Il peut y avoir des cristaux qui doivent être ramenés à température ambiante pour se dissoudre complètement lorsque la solution de lavage est en stockage à froid. Chaque réactif liquide doit être agité avant utilisation. Sortez le nombre requis de plaques et de cadres microporeux, placez les plaques microporeuses inutilisées dans des sacs auto-scellants et conservez-les à 2-8 °C.

Avant l'expérience, 20 × La solution de lavage concentrée est diluée en solution de lavage de travail par 20 fois.

6.1 Numérotation : numérotez les puits correspondants de l'échantillon et de l'étalon dans l'ordre, faites deux trous parallèles pour chaque échantillon et étalon et enregistrez la position du trou étalon et du trou échantillon.

6.2 Réaction d'ajout d'échantillon : ajouter 50 µ l/puits d'étalon ou d'échantillon dans leurs puits respectifs, puis ajouter 50 µ l/puits de marqueur enzymatique, puis ajouter 50 µ l/puits de solution de travail d'anticorps, sceller la plaque avec une membrane de couverture, agiter doucement pendant 5 secondes, mélanger et réagir à 25 °C pendant 30 minutes.

6.3 Lavage : Retirer soigneusement la membrane de la plaque de couverture, sécher le liquide dans le trou, laver complètement le trou avec une solution de lavage de travail 250 µ l/trou pendant 5 fois, avec un intervalle de 30 secondes, et le sécher avec du papier absorbant (les bulles qui ne sont pas retirées après le tampon peuvent être perforées avec une tête de pistolet propre).

6.4 Développement de la couleur : ajouter 50 µ l de solution de substrat A et 50 µ l de solution de substrat B à chaque trou, agiter doucement pendant 5 secondes et bien mélanger, et développer la couleur dans l'obscurité à 25 °C pendant 15 minutes.

6.5 Terminaison : ajouter 50 µ l de solution de terminaison à chaque trou, agiter doucement et bien mélanger pour terminer la réaction.

6.6 Mesure de la valeur d'absorbance : utiliser le testeur d'aflatoxine pour mesurer la valeur d'absorbance de chaque trou à 450 nm (une double longueur d'onde de 450/630 nm est recommandée). La détermination doit être effectuée dans les 10 minutes suivant la fin de la réaction

6.7 Le testeur d'aflatoxine automatique ST-2000A effectue automatiquement la détermination et produit automatiquement les résultats.